变性梯度凝胶电泳系统的其他改进有哪些呢?
变性梯度凝胶电泳系统的其他改进有哪些呢?
2,去除“ GC 夹板”或用化学“夹板”代替可能都会使操作简便( Costes 等 1993 年 a ; Fernandez 等 1993 年)。此外,“ GC 夹板”由连接补骨脂的多个碱基 A 替代,经过扩增,它就会与新加上去的配对碱基 T 结合在一起,经光照射后与末端共价连接在一起。现已对此方法进行了深入的研究( Costes 等 1993 年 b )。 DNA 片段中特定突变通常会产生特定的异源双链和同源双链图,所以检测人员要能够区分所检测到的突变是否为以前所描述的突变。但是,两个或更多突变产生的双链图可能比较相像,所以要确定检测出的突变是否为新发现的突变,就可以通过再次分析前加入已知突变样品( Guldberg 和 Guttler1993 年)而予以解决。如果已知突变与所检测到的突变相同,那么就会产生复合双链图,这种方法可以不用进行序列分析而对突变做出鉴定。
问:变性梯度凝胶电泳(DGGE)的上样缓冲液和琼脂糖凝胶的一样吗?具体配方是什么?
答:DGGE用:0.05%溴酚蓝,0.05%二甲苯青,70%甘油,用水配制 琼脂糖用:6xloading buffere详情>>