这个东西说起来可麻烦了，建议你去学校图书馆借一些分子生物学实验指南之类的专业书看看，里面一般都有详细的protocol。 还有，是westen的还是做双向的？这些都要说清楚才好，不然你这一问，就是一个很大的范围了。可以专门写本书了。 另外推荐一个网站，去那里看看或者参与人家的讨论，丁香园 简单给几个protocol： 6%聚丙烯酰胺凝胶电泳 电泳缓冲液为 pH8。
0 的1×TBE；制胶用6%聚丙烯酰胺胶储存液 （UREA 420。2g、Acrylamide 60。0 g、N’N-Methylenebisacrylamide 3。16 g、10×TBE 50 ml，定容至1 000 ml） 60 ml、10%过硫酸铵（APS）300 μl、TEMED 60 μl、 混合均匀后灌胶，胶型为380 mm/300 mm/0。
4 mm；电 泳程序为首先100W 预电泳30 min，插60 孔加样梳， 点样后80W 电泳60 min。 1。5。
3 银染程序：（1）脱色与固定：将胶板放入10% 冰醋酸中轻摇30min；（2）漂洗：用蒸馏水漂洗3 次， 每次3 min；（3）银染：1L 1%的AgNO3 溶液中加2 ml 37%的甲醛，放入胶板轻摇30 min；（4）蒸馏水漂洗 约20 s；（5）显影：在预冷的1L 30%的Na2CO3 溶液 中加2 ml 甲醛和200 μl 1% NaS2O3 溶液，放入胶板轻 摇直到目标片段显示出来；（6）终止：迅速将胶板转 入10%冰醋酸溶液中，终止显色反应；（7）用蒸馏 水漂洗2 min；（8）将胶板自然干燥后，记录带型并 用数码相机照相。
答：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等变性剂的条件下，对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于酶...详情>>
