闭经应与早孕鉴别，尿妊娠试验、妇科检查和B超可协助诊断。 正常的月经周期是下丘脑垂体卵巢轴正常功能的具体表现对闭经的患者，采用下列诊断步骤，有助于了解病变的所在部位进而根据患病部位寻找病因。 评估卵巢功能 1、孕酮撤血试验此试验是估计内源性雌激素水平较简单又快速的方法。具体方法是：采用孕酮油剂20mg肌注，每日一次连续5天；或口服醋甲孕酮，每日10mg，连服5天停药后2～7天，出现撤药性出血者为阳性，表示患者有功能性子宫内膜且已受足够的雌激素影响，外源性孕酮使其产生分泌期变化，停药后内膜剥脱而导致出血这种闭经称为I度闭经，估计闭经的病变部位在下丘脑垂体，从而引起排卵障碍常见于青春期下丘脑-垂体-卵巢轴不成熟、多囊卵巢综合征以及高催乳素血症患者。撤药性出血量的多少与雌激素的水平高低有关如仅有少量滴血，提示雌激素在临界水平，应引起重视。 2、阴道脱落上皮细胞检查和宫颈粘液检查阴道上皮和宫颈粘液都受卵巢激素影响而发生周期性变化。阴道脱落上皮细胞的核固缩及嗜伊红反应可反映体内雌激素水平。雌激素使宫颈粘液变稀薄拉丝长、并出现羊齿状结晶。每周化验2～3次连续一个月，可以了解雌激素水平高低，有无周期性变化。 根据报道约有33％的继发性闭经是由于高催乳素血症引起，所以在第一步检查中应包括血催乳素的测定。当血催乳素大于25μg／L（ng／ml）时应即进行蝶鞍多向断层摄片以排除垂体肿瘤。由于受条件限制，目前尚未能将血催乳素测定列为常规检查项目。 雌激素撤血试验 如果孕酮未能引起撤药性出血可能是由于内源性雌激素不足，子宫内膜未受到足够雌激素的影响以致没有正常的增生期变化之故，在此种情况下虽给孕酮并不能使子宫内膜呈分泌期变化而脱落；也可能是子宫内膜有缺陷，对雌激素不起反应。雌激素试验的目的是给予患者足够量的雌激素及孕激素以观察停药后的出血情况。具体方法是：口服乙烯雌酚，每日1mg连服20天；或炔雌醇，每日0．05mg，连服20天在服药的第16天开始，每日加孕酮20mg肌注，或口服甲孕酮每日10mg连服5天。停药后2～7天有出血者为阳性反应，表示患者具有正常功能的子宫内膜对外源性雌、孕激素能作出反应，证明闭经是由于体内缺乏雌激素之故称为Ⅱ度闭经。如果停药后没有撤药性出血，可重复一次雌激素试验目的是促使子宫内膜产生雌激素受体。如仍无出血，提示子宫内膜有缺陷或已遭到破坏称为子宫性闭经。 促性腺激素测定 对雌激素撤血试验阳性的患者应寻找缺乏雌激素的原因，区别雌激素缺乏是由于卵巢已丧失分泌雌激素的能力，还是由于体内缺乏促性腺激素而卵巢不分泌甾体激素故需测定促性腺激素。 具体方法有两种： 1、放射免疫法测定促卵泡激素（FSH）和黄体生成激素（LH）正常血清FSH值为5～40IU／L（mIU／ml）；正常血清LH值为5～25IU／L，在月经周期中，排卵高峰值约为基值的3倍经2～3次测定后可将结果分为增高、正常和降低三组。临床上FSH增高的意义较大，如FSH高于40IU／L，提示卵巢功能已衰竭如LH低于5IU／L表示促性腺激素功能不足。若FSH和LH都降低，常提示垂体或更高中枢功能低落。 2、生物鉴定法过去常用的是测定24h尿中促性腺激素（FSH和LH）含量，但由于主要是24h尿中FSH的排泄量有临床意义，故习称FSH测定24h尿液FSH的排泄量，经不同时间的2～3次测定均＞52．8小白鼠子宫单位时，提示垂体功能亢进闭经的原因在卵巢；如果24h尿FSH的排泄量
