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怎样区分口蹄疫疫苗接种和野毒感染产生的抗体?

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怎样区分口蹄疫疫苗接种和野毒感染产生的抗体?

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  • 2017-02-18 18:54:32
      动物感染口蹄疫野毒或隐性感染口蹄疫病毒,疫苗接种口蹄疫疫苗,均可以使动物产生抗口蹄疫病毒的抗体。对动物体内口蹄疫病毒的抗体进行监测,是防控口蹄疫的有效手段,因此区分疫苗免疫产生的抗体和野毒或隐性感染产生的抗体十分必要。目前研究发现,野毒感染或隐性感染口蹄疫病毒,动物体内产生针对口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC的抗体,而疫苗免疫后则不刺激动物机体产生针对3ABC的抗体。
      因此,对动物体内抗3ABC抗体的检测,可以区分感染动物和免疫动物。目前已研制出检测3ABC抗体的ELISA检测试剂盒。操作步骤如下:①用血清稀释液将待检血清样品、阳性血清、阴性血清进行1:100稀释,每孔50微升,每一个样品加2孔,置湿盒中37°C孵育1小时。
      ②用含0•01%Tween20,pH值7。4的0。01摩尔/升PBS洗板5次,每次3分钟,洗涤后甩干。③每孔加入工作浓度的酶标记二抗50微升,振荡,置湿盒刊rc辉育i小时。④用含0。01%Tween20,pH值7。4的0。01摩尔/升PBS洗板5次,每次3分钟,洗涤后甩干。
      
      ⑤每孔加入50微升底物,振荡,置湿盒中37°C避光孵育15分钟。⑥每孔加入50微升H2S04终止液终止反应。⑦轻轻摇振混匀,测OD492。⑧结果判定:每一个样均有两孔,f取平均值。OD<0。2,为阴性;在0。2-0。3之间,为可疑;效价为0-3为阳性。

    高***

    2017-02-18 18:54:32

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